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赛多利斯天平在硫酸法测定泡桐花多糖含量

导读:近年来研究发现,从泡桐花中提取的多糖,在增强机体免疫功能、抗肿瘤、抗炎、调血脂、降血糖和抗衰老等方面具有显著的生物活性,受到研究者的广泛关注。现阶段,测定多糖含量


返回列表 来源:未知 发布日期:2020-07-18 11:57【
近年来研究发现,从泡桐花中提取的多糖,在增强机体免疫功能、抗肿瘤、抗炎、调血脂、降血糖和抗衰老等方面具有显著的生物活性,受到研究者的广泛关注。现阶段,测定多糖含量的方法主要有色谱法和比色法。色谱法操作繁琐、过程复杂,很少单独用于多糖含量的测定;而苯酚-硫酸法、蒽酮-硫酸法等比色法由于操作简单、实用性强,在多糖研究中应用广泛。研究发现,苯酚-硫酸法在稳定性和准确性上均优于蒽酮-硫酸法。鉴于此,作者选择苯酚-硫酸法测定泡桐花多糖含量,首先对苯酚-硫酸法测定泡桐花多糖含量的方法学进行验证,然后在单因素实验的基础上,选择苯酚用量、硫酸用量和显色时间为变量进行3因素3水平的Box-Behnken实验设计,通过响应面法进一步优化显色条件,在最佳条件下测定泡桐花多糖含量,以期为泡桐花多糖的开发应用提供检测依据。

1材料、试剂与仪器
泡桐花,产自河南兰考,将干燥后的泡桐花用多功能粉碎机粉碎成300目,备用。乙醇、苯酚、硫酸均为分析纯,无锡亚盛化工有限公司。BF-10型多功能粉碎机,河北本辰科技有限公司;UV1800型紫外可见分光光度计,日本岛津公司;HH-2型数显恒温水浴锅,国华电器有限公司;BSA型电子天平,
赛多利斯科学仪器(北京)有限公司;PS-60型超声波清洗器,苏州创惠电子有限公司。

2泡桐花的预处理

用赛多利斯电子天平称取泡桐花粉末30.0g,石油醚脱脂,过滤,滤渣置于60℃烘箱烘干;加入600mL80%乙醇加热回流处理,以除去黄酮类物质,过滤,滤渣置于60℃烘箱烘干,称定,储存,备用。

2.1加标回收率

用赛多利斯电子天平精密称取预处理后的泡桐花粉末2.0g,按1.3.3方法制备供试溶液,再分别加入相当于2.0g样品中所含葡萄糖50%、100%和150%的标准品,每个浓度平行制备3份样品,苯酚-硫酸法显色,用紫外可见分光光度计测定490nm处吸光度,每份样品平行测定3次,计算泡桐花多糖的加标回收率及RSD,结果见表4。

3结论
对苯酚-硫酸法测定泡桐花多糖含量的方法学进行验证,在单因素实验的基础上,选择苯酚用量、硫酸用量和显色时间为变量进行3因素3水平的Box-Be-hnken设计实验,通过响应面法进一步优化显色条件,在最佳条件下测定泡桐花多糖含量。确定苯酚-硫酸法测定泡桐花多糖含量的最佳条件为:苯酚用量0.4mL、硫酸用量5.0mL、显色时间25min,在此条件下,泡桐花多糖平均含量为2.65%,RSD为2.95%,与预测值接近,说明优化后的苯酚-硫酸法稳定可靠,更加适用于泡桐花多糖含量的测定。