层色谱法是鉴别中药材复方制剂中各成分最简单准确的定性方法,应用非常广泛。为了简便、有效地控制药品的质量,提高药品的质量标准,参照《中国药典》2015年版一部相关方法利用薄层色谱法鉴别了处方中的主药白芍、丹参和黄柏,结果准确,方法简单,建立了健脾利湿和胃膏的质量控制标准。
REPROSTAR-Ⅱ型薄层摄像仪(瑞士:CAMAG);KQ-300DE型超声波清洗器:功率300W,频率40kHz(昆山超声波仪器有限公司);CP225D型电子天平(
赛多利斯科学仪器(北京)有限公司)。
1.白芍的TLC鉴别
2供试品溶液的制备:
用赛多利斯电子天平称取5g样品,加入10mL乙醇,超声溶解20min,滤过,水浴中蒸干滤液,加乙醇1mL溶解残渣,即得供试品溶液。
2.1对照品溶液的制备:
用赛多利斯电子天平精密称取10mg芍药苷对照品,加乙醇适量溶解定容至10mL,制成每1mL含1mg的对照品溶液。
2.2阴性对照溶液的制备:
用赛多利斯电子天平称取5g缺白芍阴性对照,按照同法制成阴性对照溶液。
3讨论
3.1薄层色谱鉴别法是中成药中中药成分鉴别最常用的方法,专属性强,方法简单,结果直观明了。制定中成药标准均采用薄层色谱鉴别法进行药材的鉴定。
3.2丹参的薄层鉴别实验中曾考察了用稀乙醇提取样品溶液,同法制备丹参对照药材、丹参酮ⅡA、丹酚酸B为对照溶液,用三氯甲烷-甲苯-乙酸乙酯-甲醇-甲酸(6∶4∶8∶1∶4)上行展开约4cm,取出并晾干,再用石油醚(60~90℃)-乙酸乙酯(4∶1)上行展开约8cm,取出并晾干,分别在日光及紫外灯(365nm)下检视,结果显示样品中丹酚酸B和丹参酮ⅡA的斑点不明显。试验中还考察了乙醚超声萃取和加热回流的提取方法,结果表明以加热回流的提取方法斑点最明显。
3.3黄柏的薄层鉴别方法是参考《中国药典中药材薄层色谱彩色图集》等文献中黄柏药材项下方法修改而成的。试验中曾使用三氯甲烷-甲醇-水(30:15:4)的下层溶液为展开剂,置氨然气饱和的展开缸内,展开,取出,晾干,喷以稀碘化铋钾试液,结果表明斑点分离效果不理想;还考察了浓氨试液不同加入方式对展开效果的影响,结果表明以展开缸一侧槽中加入展开剂,另一槽加入与展开剂等体积的浓氨试液,共同预平衡15min,展距10cm最为合适。
3.4文中所拟定鉴别健脾利湿和胃膏中的主药白芍、丹参和黄柏的薄层色谱法,方法操作简便、分离度高、专属性强、重现性好,可以有效控制健脾利湿和胃膏的内在质量。